擬南芥鈣調素結合蛋白cDNA克隆的分離和初步鑒定

以生物素標記的鈣調素為探針,從擬南芥(Arabidopsis thaliana)λZAPⅡ cDNA表達文庫中分離到9個陽性克隆.融合蛋白經CaM-gel overlay分析,其中Y1編碼的融合蛋白在1 mmol/L Ca2+存在下與膠體金標記的鈣調素有明顯結合.序列測定結果顯示其外源片段全長為726 bp,含有一個476 bp的開放閱讀框.GenBank數據庫搜索及同源性分析結果表明該序列為擬南芥1號染色體基因組5 661～7 013序列,編碼一未知蛋白,但與真核生物翻譯起始因子5A(eIF-5A)具87%的同源性,并具相似的分子量、等電點和相同的保守序列.與eIF-5A的結構特征比較,可初步確定Y1編碼的蛋白為真核生物翻譯起始因子5A家族中的新成員.即擬南芥1號染色體5 661～7 013序列為一尚未報道的翻譯起始因子基因.蛋白質二級結構預測其C-端122～135氨基酸殘基處有一雙親α-螺旋結構,這一結構與大多數鈣調素結合蛋白中的鈣調素結合位點的結構特征一致.該序列已提交NCBI BankIt數據庫,登錄號為AF492850.

作 者： 詹紅利 李翠風 祁倩 李國亮 凌啟閬 Zhan Hongli Li Cuifeng Qi Qian Li Guoliang Ling Qilang   作者單位： 南開大學,生物化學與分子生物學系,天津,300071  刊 名： 南開大學學報（自然科學版）  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NANKAIENSIS  年，卷(期)： 2006 39(3)  分類號： Q75  關鍵詞： 鈣調素結構蛋白   真核生物翻譯起始因子5A(eIF-5A)   表達文庫篩選  

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