溫度對鋱(Ⅲ)-轉鐵蛋白溶液構象的影響

在pH 7.4,0.01 mol/L N-2-羥乙基哌嗪-N′-2-乙磺酸(Hepes)條件下,鋱(Ⅲ)與N,N′-二(2-羥芐基)乙二胺-N,N′-二乙酸(HBED)結合并發生交換相互作用使鋱(Ⅲ)熒光增強104倍,通過監測鋱(Ⅲ)545 nm熒光強度的變化測定了Tb-HBED配合物的條件穩定常數是lgK=14.30±0.49;Tb-HBED配合物中配體、鋱(Ⅲ)熒光強度均隨著溫度的升高而降低.在pH 7.4,0.01 mol/L Hepes條件下,TbN-apoTf-Tbc配合物中蛋白質的熒光強度隨著溫度的升高而降低,而能量受體鋱(Ⅲ)的熒光強度隨著溫度的升高而增強,主要源于鋱(Ⅲ)與螺旋5色氨酸殘基間的無輻射能量轉移;當溫度由0℃上升到55℃時,平均能量轉移效率AE值增加了29%,給體、受體間距離R有約4.2%的減小,溫度變化引起TbN-apoTf-Tbc配合物大的構象變化;鋱(Ⅲ)與人血清脫鐵轉鐵蛋白的結合使蛋白質的變性溫度降低.同樣條件下,TbN-apoOTf-Tbc配合物與TbN-apoTf-Tbc配合物有所不同,雖然能量給體的熒光強度隨著溫度的增加而減小,但鋱(Ⅲ)熒光強度沒有明顯的增強;鋱(Ⅲ)對蛋白質的變性溫度幾乎沒有影響.

作 者： 楊斌盛 白海靜 劉文 豐九英   作者單位： 山西大學分子科學研究所,太原,030006  刊 名： 化學學報  ISTIC SCI PKU 英文刊名： ACTA CHIMICA SINICA  年，卷(期)： 2002 60(4)  分類號： O6  關鍵詞： 轉鐵蛋白,鋱(Ⅲ)離子,變溫,熒光光譜  

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