活細胞核漿粘滯系數的熒光相關譜研究

摘要：細胞核漿粘滯系數直接反映一定生理狀態下核內微環境的特性,是判斷病變細胞和研究核內分子功能機制的重要依據.為了實時、靈敏和無損地測定單個活細胞的核漿粘滯系數,提出了一種基于熒光相關譜(fluorescence correlation spectroscopy,FCS)技術的新型檢測方法.研究中利用FCS技術測定綠熒光蛋白分子(EGFP)在細胞核內的擴散系數,并且根據Stokes.Einstein關系式計算出核漿粘滯系數,同時實現了對特定生理條件下核漿粘滯系數的跟蹤測量.結果表明:在pH 7.4以及37℃的條件下,人肺腺癌細胞(ASTC-a-1)和人宮頸癌細胞(HeLa)的核漿粘滯系數分別是(2.55±O.61)cP和(2.04±O.49)cP,與傳統方法的測量結果一致,并且發現核漿粘滯系數大于細胞質的粘滯系數.以上研究表明RCS技術可精確無損地檢測單個活細胞內達飛升量級的微觀環境,是探索細胞內生物分子動態行為的有力工具. 作者： 梁麗芳邢達陳同生裴沂輝 Author： LIANG Li-fang  XING Da  CHEN Tong-sheng  PEI Yi-hui 作者單位： 華南師范大學激光生命科學研究所,激光生命科學教育部重點實驗室,廣東,廣州,510631 期 刊： 光譜學與光譜分析   ISTICEISCIPKU Journal： SPECTROSCOPY AND SPECTRAL ANALYSIS 年，卷(期)： 2009, 29(2) 分類號： Q632 關鍵詞： 熒光相關譜(FCS)    細胞核漿    細胞質    粘滯系數    機標分類號： TH7 R45 機標關鍵詞： 細胞核    粘滯系數    熒光相關譜    correlation spectroscopy    單個活細胞    細胞內    人宮頸癌細胞    人肺腺癌細胞    技術測定    生物分子    無損    微觀環境    生理條件    生理狀態    擴散系數    檢測方法    功能機制    跟蹤測量    動態行為    蛋白分子 基金項目： 國家自然科學基金，廣東省自然科學基金

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