人偏肺病毒TaqMan-MGB探針實時定量RT-PCR檢測方法的建立及初步應用

目的:建立人偏肺病毒(hMPV)核酸特異的快速、敏感的TaqMan-MGB探針實時定量RT-PCR檢測方法.方法:分別設計hMPV特異的引物與熒光標記探針,合成hMPV絕對定量RNA模板,建立實時熒光定量PCR方法,并與常規RT-PCR平行比較,對其靈敏性、特異性和可重復性,以及用于臨床樣本的適用性等進行評價.結果:本方法可對hMPV進行特異性診斷,檢測靈敏度可達10拷貝/25 μL,檢測線性范圍至少可達10 1～10 6拷貝/反應,且實驗重復性好,初步應用于北京地區采集的158份臨床鼻咽拭子標本,定量RT-PCR檢出31份標本陽性,明顯高于常規RT-PCR方法(22/158).結論:建立了人偏肺病毒TaqMan-MGB探針定量RT-PCR檢測方法,并初步證實可用于臨床鼻咽拭子標本的檢測,為開展hMPV的流行監測及臨床早期診斷提供了技術手段.

作 者： 陸柔劍 張陵林 譚文杰 周為民 王仲 彭堃 阮力 LU Rou-Jian ZHANG Ling-Lin TAN Wen-Jie ZHOU Wei-Min WANG Zhong PENG Kun RUAN Li   作者單位： 陸柔劍,張陵林,譚文杰,周為民,阮力,LU Rou-Jian,ZHANG Ling-Lin,TAN Wen-Jie,ZHOU Wei-Min,RUAN Li(中國疾病預防控制中心,病毒病預防控制所,北京,100052)

王仲,WANG Zhong(北京協和醫院,北京,100730)

彭堃,PENG Kun(北京市第六醫院,北京,100007) 

刊 名： 生物技術通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 19(2)  分類號： Q78  關鍵詞： 人偏肺病毒   TaqMan-MGB探針   實時定量PCR  

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