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結合引物快速簡便鑒定陽性克隆的PCR方法論文摘要

時間:2023-04-29 01:09:48 生物醫學論文 我要投稿
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結合通用引物快速簡便鑒定陽性克隆的PCR方法論文摘要

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結合通用引物快速簡便鑒定陽性克隆的PCR方法論文摘要

  摘要:通用引物與載體多克隆住點兩端序列互補,將目的片段構建入栽體pGEM-T Easy中,利用載體通用引物M13F和M13R結合片段特異引物進行菌液PCR反應.用PCR產物電泳結果來篩選陽性克隆并鑒定目的片段插入方向,同時能有效對短插入片段重組子進行篩選與鑒定.最終以DNA測序結果來驗證,與測序結果一致,顯示通用引物PCR方法對陽性克隆的篩選和鑒定優于傳統酶切和普通PCR鑒定方法,能夠彌補傳統方法的不足,且簡便快速,可作為篩選和鑒定陽性克隆的有效手段.

  作 者: 崔靜 黃愛龍 張文露 Cui Jing Hung Ailong Zhang Wenlu

  作者單位: 重慶醫科大學病毒性肝炎研究所,感染性疾病分子生物學教育部重點實驗室,重慶,400016

  刊 名: 生物技術通報 PKU

  英文刊名: BIOTECHNOLOGY BULLETIN

  年,卷(期): 2008""(3)

  分類號: Q78

  關鍵詞: 通用引物PCR 鑒定 插入方向 短插入片段

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