泌尿生殖道支原體和衣原體檢測的現狀和存在問題
[關鍵詞] 支原體 衣原體 檢測
健康網訊:
[摘 要］對泌尿生殖道支原體和衣原體檢測的現狀進行綜述，著重分析目前支原體和衣原體檢測中存在的亟待解決的問題。? 解脲脲原體（UU）、人型支原體（MH）、生殖支原體（MG）和沙眼衣原體（CT）都是寄生在泌尿生殖道的病原體，常引起泌尿生殖道疾患。支原體和衣原體感染不但是非淋菌性尿道炎（NGU）的最主要病因(90%以上)，且已成為發病率最高的性傳播疾病，已越來越受到重視。但由于技術局限，目前對其檢測仍存在不少問題亟待解決。筆者結合自己的工作經驗，綜述并分析泌尿生殖道支原體和衣原體檢測的現狀和存在問題，以裨于試劑的改進和臨床檢測方法的提高。?1 檢測現狀 1.1 培養法 支原體可用人工合成培養基培養，由于不具有甾醇合成能力，培養系統應添加含甾醇等長鏈不飽和脂肪醇豐富的物質，一般采用SP?4培養基加馬血清。MG生長所需的營養成分復雜，生長極緩慢，一般需2周～3月。CT必須采用細胞培養，一般用McCoy細胞系進行培養，但細胞培養需專業化技術、試劑和設備，要求較高，周期也較長，目前臨床一般不采用，僅在科研單位進行科研活動，或作為新診斷試劑方法學評價的金標準。培養法不能快速檢測支原體感染，一般UU和MH需2～3天才能出結果。不過隨著實驗水平提高，市面上已出現一些24 h可出結果的試劑。但MG尚未實現24 h培養出結果，因此臨床上不采用培養法檢測MG，僅用于科研活動。 目前臨床培養法檢測UU和MH多采用液體培養基，加樣培養變色判斷結果。理論上這種變色也可能由于其它微生物代謝而發生，因此要求變色后過濾除菌，再接種到固體培養基上觀察菌落。若培養基選用適當抗生素，有效地抑制雜菌生長，單純液體培養基結果就有相當高的臨床可信度。即使有個別變色是雜菌所致，標本病人也有細菌性炎癥，采用抗生素也不為過。 1.2 免疫法 采用此法檢測的試劑目前臨床較常用。一般為間接法（ELISA法或金標法）檢測抗體，比較而言金標法檢測抗體的試劑用得更多；而用于檢測支原體抗原的試劑目前尚未商品化。此類試劑一般采用夾心法檢測CT特異性脂多糖抗原(LPS)，影響較大的有金標試劑和免疫熒光試劑。由于免疫反應的特異性和酶催化底物反應的高效性或熒光信號的高敏性，故此類試劑理論上靈敏度和特異性都較高。 1.3 PCR法 此類衣原體試劑有定性和定量（多是PCR酶免試劑）兩類，而支原體試劑只有定性一類。PCR反應有較高的靈敏度，對實驗條件、試劑以及操作人員的要求都較高，操作不當易造成錯誤判斷，并且PCR定性試劑一般沒有藥品批準文號，臨床上使用應慎重。定量試劑有藥品批準文號，但面市不久，尚處于推廣中。科研單位使用PCR試劑一般用于鑒定血清型，而醫療單位使用PCR定量試劑多用于臨床療效觀察。 1.4 快速生化法 由于支原體生化酶反應速度和特異性都存在問題，目前尚無檢測支原體快速生化法試劑，但衣原體已有此方法學試劑。國內開發的生殖道CT生化檢測試劑即為此類，它是根據CT侵染上皮細胞后產生的獨特的化學結構，配以生化酶試劑與之反應，觀察變色與否判斷結果。臨床觀察資料表明，以細胞培養為金標準，此試劑的靈敏度和特異性分別為87%以上和97%以上，加之價格較低，具有良好的應用前景。2 存在問題 2.1 由于支原體在人群中廣泛存在，許多正常人也有低滴度抗體水平，單純根據一次抗體檢測結果，很難判斷標本病人是既往感染還是現癥感染，再次測定支原體抗體
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